nx دارای 23 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد nx کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
این پروژه توسط مرکز nx2 آماده و تنظیم شده است
توجه : در صورت مشاهده بهم ريختگي احتمالي در متون زير ،دليل ان کپي کردن اين مطالب از داخل فایل ورد مي باشد و در فايل اصلي nx،به هيچ وجه بهم ريختگي وجود ندارد
بخشی از متن nx :
چکیده ارزیابی مستقیم ناهه گن تعداد ذرات که سیستم های انتقال داروی نانومتریک هستند ،از جمله : لیپوزوم ها ، به علت اندازه و داشتن حامل بودن ،مشکل است . تاثیر نسبت و ترکیب لیپودیک برروی استحکام فیزیکی لیپوزوم ها در هنگام نگه داری ازطریق روش میکروسکوپی نیروی اتم (AFM ) و اسکتروسکوپی همبستگی فوتون ( ( PCS مورد بررسی قرار گرفت . لیپوزوم ها ازترکیب لیپیدهای مختلف ساخته شده و با استفاده از روشهای متفاوت و مجزای آماده سازی به دست می آیند . تصاویر AFMپس از رسوب گیری نمونه برروی سطح میکابه
دست می ایند و آبدانک ها ی کروی شکل می گیرند . در مدت هفت ماهی که آزمایش انجام شد، میانگین اندازه های لیپوزم های مختلف با استفاده از دو روش قابل مقایسه بودند . براساس آنالیز PCS ،تصاویرAFM نشان داد که تقریبا سیستم های مختلف آبدانه ای گرایش دارند که در هنگام ذخیره سازی ،توده ها شکل دهند . با افزایش ارزش شاخص پلی دیس پرسیتی می توان استحکام تضعیف شده را قوی کرد . حالات متفاوتی که مشاهده می شود ،بیشتر از روشهای آماده سازی لیپوزوم ، به ترکیبات لیپیدی نسبت داده شده اند در نتیجه روش AFM به علت نسبی بودن برای کنترل تکنولوژی میزان پراکندگی و ترسیم فاکتورهای آماده سازی مفید است .
مقدمه : لیپوزوم ها ابدانک کلوئیدی هستند که از طریق هیدارتاسیون قشرهای نازک حشک شکل می گیرند . فسفولیپیدها به طور معمول برای آماده کردن این سیستم ها استفاده می شوند . به طوریکه خود به خود د رمحلول آبی انباشته شده و یک یا چندین لیپید دو لایه ای را می سازند که این دو لایه ایی ، هسته آبی را در برمی گیرد . اکثر اوقات لیپوزوم ها به عنوان یک فرمول استفاده می شود . بادر نظر گرفتن شیمیایی بودن نسبی آنها از لیپیدهای بیودگردبل و بیوکوم پتیبل می توان بسیاری از داروها به صورت کپسول در آورده که به همین روش محصولات دیگری از جمله :داروهای نیرو بخش روانی ،داروهای ضد قارچی و ضد سرطانی تولید شده اند . (گولاتی -1988 . لیان وهو -2001 ) از اساسی ترین محدودیتهای فرمول
لیپوزوم ها ناپایداری آنهاست . علت ناپایداری شیمیایی آنها به دلیل فرایند ترکیب اکسیژن با اسیدهای چربی اشباع نشده و استربوندهایی است که از طریق آب تجزیه شده اند . در حالی که ناپایداری فیزیکی این لیپوزوم ها به خاطر نشست دارو و انبوهش ویا پراکندگی آبدانک هاست که ذرات بزرگ رامی سازند این ناپایداری ها بروی حالات بافت زنده ی لیپوزوم ها تاثیر می گذارد . از این رو نیاز است که قبل از به کار بردن فرمول لیپوزومال برای درمان های دارویی، تحقیقات بسیاری انجام می گیرد . مواردی چون کوچکی ، تک پاشیدگی و آبدانکهای مقاوم برای آماده سازی بهینه نیاز هستند چرا که غلظت پلاسمهای دارویی لیپوزوم های بزرگ ممکن است به سرعت از طریق سیستم reticulondo the lial (Res) کاهش یابد و در
نتیجه این لیپوزوم هاتخلیه شوند مشاهدات ویژگیهای هندسی اندازه و خصوصیات لیپوزوم هادر محیط آبی در کاربرد پتانسیل سیستم ها به عنوان دارو ،از جمله نکاتی هستند که باید به آنها توجه داشت . از این رو راههاو روش های بسیاری از جمله میکروسکوپی وانواع مختلف اسپکتروپی ها ،به عنوان بهترین ابزار برای توصیف لیپوزوم ها به کار گرفته شده اند .
در طی چند سال گذشته كاربرد AFM در زمینه های بیوتكنولوژی،وسایل نیمه رسانا ،پلیمرها،قشرهای نازك وسطح كانی و همچنین در زمینه بیولوژیكی ودرارو سازی افزایش یافته است . به عنوان مثال از AFM همواره برای تصویرسازی سطوح باكتریایی (بونارت -2002) ،غلظت پلیمر –دی. ان.ای (مارتین -2000 ) نانو پارتیكل های چربی جامد (زر محلن -1996 )وتعییرات مورفولوژی لیپوزوم دی.ان.ای .(D.N.A ) استفاده می شود . AFM یكی از روشهایی است كه در خانواده میكروسكوپهای اسكن كننده با قدرت بالایA1 ،این امكان رافراهم میكند كه حتی لیپوزومهای بسیارریز رادرمحیط طبیعی ،بدون هیچ دخل وتصرفی در نمونه آن را ببینیم . به دلیل صراحت نسبی AFM ،از این روش میتوان برای كنترل تكنولوژی میزان پراكندگی
استفاده كرد . هدف این مقاله این است كه كاربرد AFM را به منظور توصیف ونگهداری استحكام لیپوزوم های معلق كلوئیدی بالا ببرد وروش AFM را با اسپكتروسكوپی همبستگی موتون مقایسه كند . همچنین باید در نظرداشت كه تركیبات چربی لیپوزوم می تواند بر روی ساختارهای حمال تأثیربگذارد .به عنوان مثال از چربی ها در قابلیت بار گذاری ،ویژگیهای سلولی و در تقسیم بدنی و لیپوزوم معلق در مقدارهای متفارت استفاده می شود . دو چربی طبیعی چون فسفاتید كلین و كلسترول و یكی از معروفترین چربی ها كه كاتیون فعال دارد dimethy
ldioctadecy lammonium bromide میاشد كه معمولاً درآماده سازی لیپوزوم ها به عنوان جزء سازنده ی لیپوزمال استفاده می شوند .در اینجا بیشتر ما بر روی استحكام لیپوزونهایی كه كاتیون فعال داریم تمركز كرده ایم،چراكه بیشترین سیستم های لیپوزومی در كاربردهای كلینیكی استفاده میشود . لیپوزومها كاربرد دارند . اطلاعات اضافه ی دیگری در مورد ساختار غشاء وویژگیهای سطحی آنها می توان برای توضیح مكانیزم ، كنش متقابل میان چربی ها ومواد ژنیتیكی مفید است .
لیپوزومها به روشهای متفاوتی تولید می شوند ،از جمله : تركیب ساده آنها با تجزیه وتحلیل چربی ، شستشوی soni cotion به مدت طولانی وهموژنیزه كردن به ویژه با استفاده از روشهای میكروسكوپی الكترون(معمولاً TEM) میتوان میزان پراكندگی وشكل آبدانك ها را به دست آورد. متاسفانه آبدانك های فسفرلیپید ممكن است براثر دگرگونی ساختار كه در نتیجه شرایط خلاء زیاد وپروسه آلودگی اتفاق می افتد ،آسیب ببیند.این نمونه برای مطالعه مواد آلی كه باسیستم های زنده ی محلول آبی در ارتباط است ، یك نقص بزرگ محسوب میشود .در این مقاله ،به بیان اطلاعاتی در مورد ابعاد وهمگنی آبدانك ها كه با روش اسپكتروكوپی همبستگی فوتون (PCS )و میكروسكوپی نیروی اتمی (AFM ) به دست آمده ، می پردازیم . تأثیر تركیبات لیپوزومال و پروسه آماده سازی برروی استحكام فیزیكی كلوئیدی مورد بررسی قرار گرفت .
پتانسیل زتال ذرات وظیفه دارند كه از ذرات در یك محیط خاص استفاده كنند . اطلاع از پتانسیل زتای آماده سازی لیپوزوم به پیش بینی استحكام وسرنوشت لیوزوم های بافت زنده كمك می كند . از این رو ، مقدارپراكندگی پلی دیس پرسیتی ها را می توان با استفاده از PCS به دست آورد ، واز طرف دیگر پتانسیل های لیپوزومال های معلق در آب وساكاروز در خصوصیات لیپوزوم هانقش دارند .
2- مواد و روشها 21 مواد فسفات كلین زرده تخم مرغ (PC) كه فلوكای سوئسی آن را به دست آورد بود وكلسترول (chol ) و(pdab) dime thy ldioctadecy lammonium bromide از شركت سیگها- آلدریچ (میلان ، ایتالیا ) ودیگر مواد شیمیایی ومواد حلال از منابع استاندارد خود بدون هیچ تصفیه وپالایشی تهیه شده اند . سیستم آبی Q-MILLI-GL ( مپلی پور- بدفورد – ام . ای – ایالات متحدآمریكا ) كه در آب مقطر استفاده می كند آبی با خالصیت ( M 18) برای استفاده در این آزمایشات فراهم می كند .2-2 روشها 221 –آماده سازی لیپوزومها
برای آماده كردن لیپوزوم ها از تركیبات شناخته شده و پروسه ی استاندار استفاده می شود . به ویژه محلول كلروفوریك كلسترول ،DDAB و PC به مناسبتهای گوناگون در دستگاه تبخیر گردان .تبخیر می شوند تا لایه نازكی بر روی دیواره های اطراف كف با اون شكل بگیرد . لایه لیپیدیك به مدت سه ساعت در فضای خشك نگه داشته می شود وبه منظور بالا رفتن استحكام لیپوزومال در محلول ساكروز 9% (W,V ) و آب تصفیه شده معلق می ماند . سرانجام كیسلو (2003 ) ثابت كرد كه آبدانك های (DPMC ) lcholineDimyris t Oylphos phatidy كه در محلول آبی ساكاروز 15% – 5 آماده میشوند به مدت 32 روز استحكام بهتری دارند .وهمچنین تحقیقات نشان داده است كه استفاده از محلول ساكاروز ، از رخنه كردن دارو در میان لیپوزومال های دولایه ایی جلوگیری وآبدانك ها در طول پروسه ی خشك شدن با یكدیگر تركیب می شوند (كرو 1997 ) لیپوزوم های تك لایه ای كوچك از طریق سه پروسه به دست می آیند :
از طریق شستشوی sonication ( برلین –آلمان ) به مدت یك ساعت . از طریق هموژنیزه كردن به مدت هفت دقیقه در درجه حرارت 500/20 (آلتراتوراكس 125 ، لابراتور فنی كن كل كان – آلمان ) . ودو مرتبه از طریق شستوشوی sonication به مدت ده دقیقه ویا از طریق گردابی(z*3velp ) به مدت پنج دقیقه وسپس شستوشوی sonication به مدت ده دقیقه .لیپوزوم های به دست آمده با عبور كردن از منفذه های 02 میلی متری غشا ptfe ،تصفیه می شوند .آماده سازی پارامترهای فرمول لیپوزوم كلوئیدی جدول(1)
روش آماده سازی (نسبتها) تركیبات نمونه
برای كنترل استحكام نمونه . آماده سازی در دمای اتاق ویادر دمایc4 به دوراز نور انجام میگردد222- آنالیز اسكتروسكوپی همبستگی فوتوناز PCS برای مشخص كردن اندازه ی آبدانك ها استفاده می كنند .( زتامستر، ابزارمال ورن ) .در آزمایشاتی كه انجام شد از لیرز به عنوان منبع نوری استفاده شد . این لیزركه لیرز 45MW نامیده میشود،خروجی با قدرت بالا ی 640nm در5mw دارد . اندازه گیری های pcs در زاویه ی 90 را نشان داده شده اند . كار كرد همبستگی از طریق آنالیزاتور ذرات میكروسكوپی pcs مال ورن انجام شد واز تركیب مناسب سه راسته .
(چو-1974 . برن وبكورا – 1976 ) میانگین قطر وپلی دیس پرسیتی به دست می آید . انكساری واقعی دغیر واقعی شاخص از 55 تا 1059 در نظر گرفته می شود . نمونه ها در محلولهای ساكروز 9% (w/v ) وآب تصفیه شده رقیق می شوند (1:100 ). آزمایشات تكراری برروی نمونه انجام میشود و برای هر آزمایش سی اندازه گیری انجام می شود و اطلاعات بر اساس میانگین+ انحراف معیار بیان می شود .
223- تصویر سازی میكروسكوپی نیروی اتمی “پارك آتوپ روب ” انجام شد .تصاویر AFM از طریق اندازه گیری كنش متقابل نیروهای بین نوك وسطح نمونه به دست آمده است .(یالامانچیلی -1998 ) .آزمایشات در دمای اتاق ،در زیر آب انجام می شود (C20 ( ودر فشار اتمسفری (mmhg 760 ) به شیوه ی بدون تماس (NC-AFM) انجام گرفت به صورتیكه فضای بین نوك ونمونه از 10 تاA 100 ونیروی كلی بسیار كم است . این نیروی كم ، برای مطالعه وبررسی نمونه هالزم و شكل پذیر مناسب است . نوكهای سیلیكون مثلثی شكل برای این آنالیز استفاده می شود .فركانس تشدید كننده ی این كانتیلور در حدود KHZ300 . به منظور ترسیم لیپوزوم ها ، روش بدون تماس مناسب تر است چرا كه آبدانك ها ،آمادگی كمی برای بار كردن نیروهای اعمال شده دارند. قبل از آنالیز ، نمونه ها در آب رقیق می شوند .
(1:100 ) تا کمی شاره چسبناک برای تجزیه و تحلیل به دست آورند . حجم ثابت قطره های ریز (40mm ) می باشد که بر روی صفحه کوچک میکا تا قطر 1cm ته نشین می شود . بعد از دو دقیقه برای انتقال دادن آب اضافه از برگه های فیلتر استفاده می کنیم دو نوع تصویر به دست می آید : تصویر اولی تصویر توپوگرافی است و تصویر دومی گه “سیگنال اشتباه ” را نشان می دهد این سیگنال اشتباه از طریق مقایسه دو سیگنال به دست آمده اند سیگنال اول ، دامنه ارتعاشات پایه و ئیگر نقطه مبدأ دامنه را نشان می دهد . تصاویری که از این
روش به دست می آید تغییرات سطحی نمونه ها را نشان می دهد اندازه لیپوزوم ها در تصاویری مجزا در خطهای قرار دادی که آبدانک ها ی کوچک را قطع می کند نشان داده شده است برای اندازه گیری بعد لیپوزوم ها ما یک خط را انتخاب کرده و موقعیت هر لیپوزوم را در دو طرف آن محدود می کنیم تمام اطلاعات میانگین اندازه گیری ها در هر آزمایش نشان می دهد .
4 . 2 . 2 – اندازه گیری پتانسیل الکترونیکی :به منظور بررسی ویژگی های سطحی لیپوزوم ها از آنالیزاتور الکتروفورسیس ذرات زتامستر که مجهز به لیزر 5Mw he-Ne است برای اندازه گیری جنبش الکترونیکی و پراکندگی پتانسیل زتا استفاده می کنند .(ابزار مال ورن ) زتا گسترده حدود تغییرات را در v120 تا 120 – محدود می کند . پارامترهای استروبینگ در مجموعه های زیر قرار می گیرند : تاخیر استروب oo10 – 0 زمان روشن ms 20000 . زمان خاموش ms oo.1 . با استفاده از یک smoluchowslcy ثابت 15 از (ka)F مقدار پتانسیل زتا را از جنبش الکتروفورتیک به دست می آوریم . برای این آنالیز ، نمونه در محلول ساکروز و آب تصفیه شده رقیق می شود (100 : 1( ده اندازه گیری مختلف برای هر نمونه انجام می شود .3- نتایج و مذاکره 31 – آنالیز PCSآنالیز PCS لیپوزوم ها درست بعد از آماده سازی ، باعث می شود که اندازه متوسط آبدانه ها در حدود nm200 باشد و پلی دیس پری سیسمی شاخصی پائین تر از 02 را نشان می دهد . این اطلاعات وجود سیستمهای همگن بعدی را متذکر می شود . به ویژه در پروسه تصفیه سازی با عبور از فیلتر PTFE که منفذی با قطر 20 mm دارد ، می تواند آبدانک های کوچک یک لایه را تولید کند . میانگین تغییرات که از طریق اندازه گیری PCS به دست آمده در تصویر (1) نشان داده شده است . لیپوزوم ها در C 4 و در دمای اتاق استحکام یکسانی دارند و حتی لیپوزوم هاینمونه های 5 و 6 شاخص متوسط در دمای اتاق بیشتر دوام پیدا می کنند . لیپوزوم های PC از طریق هموژنیزه کردن در درجه حرارت 500/20 (نمونه (1)) استحکام و پایداری بیشتری از خود نشان می دهند . در زمان نگهداری ، لیپوزوم ها توده بزرگی را تشکیل می دهند . افزایش ارزش شاخص پلی دیسپریستی (تصویر(2)) بر درستی این فرضیه ها نیز صحه می گذارد و میدان گستره آبدان های سیستم های کلوئیدی را نشان می دهد .
اندازه(mm)میلی متر
ا ندازه(mm)میلی متر
تصویر 1 : تغییر میزان میانگین که تابع زمان است به روش آنالیز لیپوزومال های کلوئیدی معلق PCS که در دمای C 4 (a) و یا در دمای اتاق )b) نگه داشته شده اند . ارزش متوسط شش آزمایش انجام شده +- انحراف معیار
به عنوان مثال : میانگین اندازه لیپوزوم ها که در دمای اتاق نگه داشته شدند ، با افزایش pc و DDAB در ظرف مدت هفت ماه تغییر ابعادی لیپوزوم های آماده شده در استفاده از PC، DDAB و CHOL(نمونه 3)در مقایسه با لیپوزوم های (نمونه 2) محدود می شوند . استحکام فیزیکی (mol :mol) 1:1 PC/DDAB لیپوزوم های (نمونه 2 ) با افزودن کلسترول زیاد می شود و شکل آن به (mol:mol:mol) 1:1:1 PC/DDAB/CHOL تغییر می یابد . کلسترول به داخل لیپوزوم های دو لایه ای وارد می شود . شارندگی و آبدانه های داخلی لیپوزوم هایی را که بیشتر سفت هستند را تغییر می دهد ، براساس تصویر 1 . میانگین اندازه ی نمونه های 1 و 3 در ظرف مدت هفت ماه در مقایسه با دیگر نمونه ها مقاوم و قابل مقایسه هستند . اگرچه شاخص پلی دیس پریستی (نمونه 3 ) ثابت کرد که با گذشت 4 ماه از نگهداری نمونه های ، ناهمگنی انبوه لیپوزومال بیشتر می شود . سیستم های آبدانک دار که با DDAB و کلسترول به دست می آیند ، در مورد میدان گستره اندازه متوسط از 40تا 81 mm که به پروسه آماده سازی بستگی دارد ، اطلاعاتی به ما می دهد .(تصویر 1) . ترکیب لیپیدی نمی تواند در مقاومت لیپوزوم ها نقش داشته باشد . جداسازی لیپیدی به دو دسته ی کلسترول و DDAB می تواند ناپایداری و بعد ، از هم پاشیدگی فسفر لیپید را به دنبال داشته باشد .
ادامه خواندن مقاله ميکروسکوپي نيروي اتمي و اسپکتروسکوپي همبستگي فوتون دو روش براي سرعت بخشيدن به ترسيم ليپوزوم ها
نوشته مقاله ميکروسکوپي نيروي اتمي و اسپکتروسکوپي همبستگي فوتون دو روش براي سرعت بخشيدن به ترسيم ليپوزوم ها اولین بار در دانلود رایگان پدیدار شد.