مقاله در مورد هماتوكريت يا حجم فشرده گلبولي

 nx دارای 54 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است فایل ورد nx  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد. این پروژه توسط مرکز nx2 آماده و تنظیم شده است توجه : در صورت  مشاهده  بهم ريختگي احتمالي در متون زير ،دليل ان کپي کردن اين مطالب از داخل فایل ورد مي باشد و در فايل اصلي nx،به هيچ وجه بهم ريختگي وجود ندارد بخشی از متن nx : هماتوكریت یا حجم فشرده گلبولی مقدمهخون بافتی است كه از 2 قسمت سلول ها و مایع تشكیل شده است. سلول ها عبارتند از گلبول های قرمز داریتروسیت ها، گلبول های سفید (كلوسیت ها) و پلاكت ها مایع خون را پلاسما گویند كه حدوداً از 90 درصد آب و 10 درصد مواد جامد محلول در آن تشكیل شده است. پلاسما شامل مواد پروتئینی، الكترولیت ها (مانند سدیم، پتاسیم، كلسیم، بیكربنات و …) قند، كلسترول، اسیدهای چرب، فسفولیپیدها، آنزیم ها و غیره می باشند. اعمال مختلف خون در بدن عبارتند از: 1- حمل اكسیژن به بافت ها و خارج كردن دی اكسید كربن از آنها 2- حمل مواد غذایی به بافت ها 3- انتقال فرآورده های متابولیسمی برای دفع به كلیه ها، كبد، ریه، روده، پوست 4- تنظیم آب داخل و خارج سلولی 5- تنظیم حرارت بدن با انتشار خون در بافت ها 6- توزیع هورمون ها و سایر مواد 7- دفاع بدن و ایجاد ایمنی خون به عنوان یك بافت با اعمال فوق دارای ویژگی هایی است كه آن را از سایر بافتها متمایز كند. هنگامی كه خون كامل دارای ماده ضد انعقاد سانتریفوژ می شود، فضایی كه به وسیله گلبول های قرمز فشرده شده اشغال می شود، اصطلاحاً هماتوكریت نام دارد و به صورت درصد گلبول های قرمز خون نسبت به خون كامل بیان می شود. به عبارت دیگر هماتوكریت یك نمونه خون، نسبت حجم گلبول های قرمز به حجم كل خون است . همچنین هماتوكریت به عنوان PCV یا حجم گلبول های قرمز فشرده شده شناخته شده است مقادیر هماتوكریت كاملاً به موازات مقادیر و تعداد گلبولهای قرمز خون است. مقادیر نرمال هماتوكریت همانند هموگلوبین و تعداد گلبول های قرمز خون تحت تأثیر عوامل مختلفی مانند سن، جنس، نژاد و محیط و … قرار می گیرد. روش های خون گیری از ماهی: 2 روش كلی خون گیری در ماهیان است: 1) روش خون گیری مكرر از یك ماهی Serial Blood Sampliny2) فقط یك بار خون گیری Once Only Sampling روش خون گیری مكرر به دلیل استرس ناشی از خون گیری كمتر استفاده می شود لذا محققان روش فقط یك بار خون گیری را توصیه می كنند. زمانی كه زنده بودن ماهی پس از خون گیری مهم نباشد می توان ماهی را كشت به 3 طریق: 1- یك ضربه محكم و سریع را با استفاده از یك شی فلزی دسته اسكالپر، به ناحیه اتصال جمجمه و ستون مهره ها در ناحیه سر وارد كنیم. در این حالت نخاع قطع شده و منجر به مرگ می شود. 2- نخاع را قطع كنیم و با فرو كردن و حركت جانبی تیغه اسكالپر در محل اتصال جمجمه به اولین مهره ستون فقرات در ناحیه سر با یك حركت افقی 3- استفاده از مواد بیهوش كننده با غلظت بیش از غلظت لازم برای بیهوشی در صورتی كه بخواهیم ماهی زنده بماند پودر Ms 222 را به نسبت خاص برای ماهی مورد نظر حل كرده ماهی ها را یكی یكی درون محلول گذاشته و پس از 2 دقیقه بیهوش می شوند ماهی را خشك كرده از پهلو روی میز گذاشته از بالای ساقه دمی باز اولیه 45 درجه در كنار خط جانبی وارد عضله شده وقتی سرنگ به ستون مهره جاندار رسید با بازی در آن به رگ های این قسمت رسیده و با كشیدن پیستون سرنگ مقدار خون مورد نیاز به دست می آید.یا از انتهای باله مخرجی در قسمت ساقه دمی و از قسمت شكمی ماهی به صورت عمودی سوزن را وارد عضله ماهی كرده و وقتی بر ستون مهره رسید (به شبكه رگ های این قسمت) با كشیدن پیستون سرنگ ؟؟؟ تأمین می شود (جمالزاده، 1380) از نواحی مختلف می توان خون گیری كرد: – قطع ساقه دهی در ماهی كوچك – در ماهیان بزرگ تر خون را می توان با استفاده از آئورت پشتی یا Dosal aortic puncture آئورت شكمی –قلب به دست می آید.زمانی كه ماهی ما ارزش داشته باشد و زنده ماندن آن مهم باشد و ولش لوله گذاری Canultion مطرح است كه مانند قرار دادن یك 3 راهی لوله ای نازك در وسط جریان خون است. كه برای ماهیان بزرگ تر استفاده شود. سر لوله گره زده می شود و هر وقت نیاز باشد خون از این منطقه برداشته می شود. (محل قرارگیری 3 راهی لوله ای نازك كمان آبششی رگ های آوران – وابران است) بهترین نتایج از تلفیق روش های كشتن ماهی Stunning به همراه استفاده از ماده ضد انعقاد مپارین و نگه داری نمونه خون گرفته شده در سرما و سرعت عمل در انجام مراحل حاصل می شود.مواد و روش كار: ماهی از خانواده Cyprinidae (كپور-ماهی حوض) قیچی خط كش خواندن هماتوكریت سانترینوژ هماتوكریت خمیر هماتوكریت (موم) Cristoseal لوله هماتوكریتهماتوكریت را ممكن است مستقیماً به وسیله سانتریفوژ و به روش های ماكرو یا Wintrobe و نیتروب و میكروهماتوكریت اندازه گیری كنند یا به صورت غیر مستقیم توسط دستگاه های اتوماتیك و از حاصل ضرب MCV در شمارش گلبول های قرمز به دست آورند.روش و نیتروب در گذشته استفاده زیادی داشت ولی امروزه به علت زیاد بودن خون مورد نیاز، مدت زمان طولانی سانتریفوژ و زیاد بودن پلاسمای به دام افتاده در لابه لای گلبول های قرمز كاربرد كمی دارد. روش میكروهماتوكریت Microhatocrit در این روش از لوله های میكروهماتوكریت با طول تقریباً 7 سانتی متر و قلمرو یك میلی متر استفاده شود در انتهای لوله های میكروهماتوكریت یك حلقه رنگی وجود دارد. در لوله های میكروهماتوكریت فاقد ضد انعقاد، حلقه آبی و رنگ و در لوله های میكروهماتوكریت آغشته به ماده ضد انعقاد هپارین، حلقه قرمز رنگ یافت می شود. لوله های اخیر را با هپارین كه به نسبت یك به 1000 رقیق شده است پر كرده و سپس در حرارت 56 تا 37 درجه سانتی گراد خشك می كنند اگر از خون دارای ماده ضد انعقاد استفاده می شد باید لوله های آبی رنگ استفاده شود ولی چنانچه از خون مویرگی استفاده می شود از لوله های میكروهماتوكریت با حلقه قرمز رنگ استفاده شود. سانتریفوژ میكروهماتوكریت دارای حوزه سانتریفوژی 10000 تا 15000 است كه پس از روشن شدن در عرض 3 ثانیه به حداكثر سرعت می رسد. در روش میكرو، لوله های مو ئینه مدرج نیستند در این روش باید ارتفاع ستون خون را كه شامل پلاسما گلبول های قرمز است با خط كش میلی متری مخصوص یا صفحه مدرج مخصوص میكروهماتوكریت، قرائت كرد. اینجا * 1- ماهی را قطع ساقه دمی كرده لوله هپارینه را در تماس با خون قرار می دهیم لوله میكروهماتوكریت را به طوری كه حباب مواد ایجاد نشود پر می كنیم.2- انتهای خشك لوله میكروهماتوكریت را در وضعیت عمودی در خمیر هماتوكریت فرو كرده تا در حدود 6-4 میلی متر از انتهای لوله از خمیر پر شود. در حین عمل نباید به خون موجود در لوله فشار وارد شود. 3- دو لوله هماتوكریت را در شیارهای شعاعی سانتریفوژ، به طوری كه در وضعیت مخالف و روبروی یكدیگر باشند قرار داده انتهای بسته لوله ها باید به طرف خارج صفحه سانتریفوژ قرار داشته باشد. 4- به مدت 5 دقیقه دستگاه را به كار بیاندازید با استاندارد 7000 rpm 5- به محض اینكه سانتریفوژ متوقف شد لوله های میكروهماتوكریت را از آن خارج كرده و با استفاده از خط كش یا جدول مدرج مخصوص، هماتوكریت را برحسب درصد قرائت می نمائیم اختلاف 2 لوله هماتوكریت باید در حدود درصد باشد در غیر این صورت باید آزمایش تكرار شود. (عامری 1378)نتایج:هنگامی كه خون كاملاً سانتریفوژ می شود گلبول های قرمز به علت وزن مخصوص زیادتری كه نسبت به سایر عناصر خونی دارند در ته لوله قرار می گیرند به طوری كه به ترتیب از سر لوله به پایین طبقاتی به شرح زیر ایجاد می شود: 1- پلاسما: طبقه زرد رنگ الف- ترمبوسیت ها: طبقه رویی به رنگ كرم ب- مكوسیت ها: طبقه خاكستری قرمز رنگ ج- گلبول های قرمز هسته دار كه در لایه بافی كوت در صورت وجود ایجاد رنگ قرمز می كنند. 3- طبقه گلبول های قرمز (عامری 1378) برای خواندن میزان هماتوكریت ها با خط كش هماتوكریت: لوله هماتوكریت را در شیار خط كش هماتوكریت قرار داده و انتهای پایین ستون گلبول های قرمز را با خط صفر تنظیم كرده سپس خط سفید متحرك میانی را با سطح بالای گلبولهای قرمز تنظیم و درصد حجم گلبولهای قرمز را از روی ستون مندرج می خوانیم. میزان Hc+ در ماهیان بالغ بیشتر از نابالغ است. (جمالزاده 1380)این در آزمایش هماتوكریت به ترتیب زیر است: (1979) Smeda , Hooston . (1979) Millich 8 Catlettدر مطالعات حجم خون پلاسما را 8/2 و 3 درصد محاسبه نموده اند. حجم خون ماهیان نسبت به سایر مهره داران كمتر است. در ماهیان اسلاموبرانش این میزان بین 6-8 میلی بیتر به ازاء 100 گرم و در استخوانی بین 2-4 میلی لیتر به ازاء 100 گرم است. میزان هماتوكریت را با درصد نشان می دهند. معمولاً در ماهیان اسلاموبرانش (آبشش صفحه ای ها) میزان هماتوكریت كمتر از 25 درصد است. در ماهیان استخوانی این میزان بین 10 تا 30 درصد متغیر است. در كپور معمولی حدود 27 درصد است. درماهیان دریایی فعال مثل تن ماهیان یا Thunnus بالاترین میزان هماتوكریت كه حدوداً بیش از 50 درصد است مشاهده شده است. (هماتوكریت انسانی 45 درصد). میزان هماتوكریت و به تبع آن هموگلوبین با توجه به عواملی چون گونه، فصل، دما، وضعیت تغذیه و بهداشت ماهی متفاوت است در برخی گونه های وجود تغییرات شبانه روزی هم گزارش شده است. یكی از عوامل تغییر هماتوكریت ماهیان تنظیم فشار اسمزی است. در صورت عدم تنظیم فشار اسمزی در ماهیان آب شیرین به دلیل ورود بیش از حد آب به بدن خون این ماهیان رقیق شده و همودیلیشن از آب شیرین به شور بالا می رود. و Hct كاهش می یابد. در ماهیان آب شور به دلیل خروج آب از بدن خون غلیظ شده و Hemoconcentration و Hct و هماتوكریت، آن بیشتر می شود به نظر می رسد Hct ماهیان دریایی از این نظر بیش از ماهیان آب شیرین است.بحث: 1- سرعت و مدت كافی برای سانتریفوژ كردن شروط اساسی در به دست آوردن یك هماتوكریت صحیح است گلبول های قرمز توسط سانتریفوژ كردن باید آنقدر فشرده شوند كه با سانتریفوژ كردن بیشتر حجم گلبول های قرمز متراكم، كاهش پیدا نكند.2- اگر انتهای لوله های میكروهماتوكریت به طور ناقص بسته شود باعث كاهش كاذب نتایج خواهد شد. 3- عدم سانتریفوژ كافی و همچنین ماندن لوله ها به مدت بیشتر از 10 دقیقه پس از اینكه سانتریفوژ متوقف شد باعث افزایش كاذب نتایج خواهد شد. 4- اگر مقدار ماده ضد انعقاد بیش از حد نیاز باشد به علت چروكیده شدن گلبول های قرمز خون باعث كاهی كاذب خواهد شد. 5- در حین عمل سانتریفوژ كردن، بخش كوچكی از گلبول های سفید، پلاكت ها و پلاسما در میان گلبول های قرمز به دام می افتند كه خطای ناشی از آن اهمیت چندانی ندارد. افزایش هماتوكریت حامل از پلاسمای به دام افتاده (Trapped Plasma) گاهی بیشتر از هماتوكریت حاصل از گلبول های سفید و پلاكتهای به دام افتاده است كاهش نیروی سانتریفوژ باعث افزایش مقدار پلاسمای به دام افتاده در میان گلبولهای قرمز می شود و همچنین مقدار آن در روش هاكر و بیش از میكرو است. در روش میكرو هماتوكریت، پلاسمای به دام افتاده حدود یك تا 3 درصد كل ستون گلبول های قرمز متراكم می باشد. 6- به علت كمتر بودن زمان سانتریفوژ و نیز خطای ناشی از پلاسمای به دام افتاده روش میكرو هماتوكریت بر روش ماكرو ارجحیت دارد و به عنوان روش مرجع توسط كیته بین المللی استاندارد كردن هماتولوژی (ICSH) توصیه شده است. میزان خطای این روش 2-1 درصد است. 7- برای به دست آوردن نتایج صحیح نمونه ها باید در سرما نگهداری شوند. 8- در هنگام قرائت Hc+ باید بالاترین حد لایه گلبول های قرمز خوانده شود این مطلب زمانی كه تعداد گلبول های سفید یا پلاكت ها افزایش شدید دارد دارای اهمیت فراوان است. (عامری 1378)9- مقدار هماتوكریت به اندازه تعداد گلبولهای سرخ و همچنین حجم پلاسما بستگی دارد اگر مقدار آن بیش از اندازه طبیعی باشد می تواند نمودار افزایش گویچه ها یا كاهش حجم پلاسما باشد. – اگر مقدار هماتوكریت كمتر از حد طبیعی باشد ممكن است به دلیل كاهش تعداد گویچه های قرمز یا افزایش حجم پلاسما باشد (كم خونی- انسانی) 10- از آنجایی كه هموگلوبین معمولاً حجم گلبول قرمز را اشغال می كند میتوان با تقسیم كردن PCV بر عدد 3 مقدار تقریبی Hd را برحسب گرم در دسی لیتر به دست آمد. و با توجه به اینكه PCV بستگی كامل به اندازه و مقدار گلبولهای قرمز موجود در واحد خون دارد می توان از تقسیم كردن PCV به عدد 6 مقدار تقریبی گلبول های قرمز را در یك میلی مترمكعب خون بر حسب میلیون به دست آورد. (عامری 1378)تهیه گسترش خون (Blood Smear Preparation) بررسی گسترش خونی بخش مهمی از ارزیابی هماتولوژی را تشكیل می دهد. قابل اعتماد بودن اطلاعات به دست آمده از بررسی گسترش خونی، بستگی زیاد به تهیه و رنگ آمیزی خوب گسترش ها دارد. در اینجا سه روش برای تهیه گسترش های خون شرح داده می شود كه عبارتند از: روش گسترش روی لام ‌( Slide Film) یا روش دو لامی یا روش گوه ای (The two slide or wedge method) روش گسترش روی لامل (Cover glass method) و روش خودكار یا چرخشی (Spinner method). دو روش اضافه بر روش های فوق برای تهیه‌گسترش های خون در برخی موارد مورد استفاده قرار می گیرند. یكی از این موارد تهیه گسترش از لایه بافی كوت (Buffy coat) در لوله های میكروهماتوكریت است و هنگامی مورد استفاده قرار می گیرد كه تعداد گلبول های سفید خون به شدت كاهش یافته است و این روش باعث تغلیظ سلول های هسته دار خون می گردد. روش دیگر تهیه گسترش ضخیم خون (Thick blood smear) است كه معمولاً برای جستجوی انگل های خونی انجام می شود. پس از تهیه‌گسترش خون، رنگ آمیزی های عمومی یا اختصاصی انجام شده و بررسی مرفولوژی سلول های خونی و شمارش افتراقی گلبول های سفید بر روی آن صو رت می گیرد. 1- روش تهیه‌ گسترش بر روی لام یا روش دو لامی یا گوه ای 1- دو عدد لام شیشه ای تمیز انتخاب كنید (لام هایی كه برای تهیه گسترش خون به كار می روند باید كاملاً سالم و عاری از هر گونه آلودگی و غبار باشند (چنانچه این لام ها قبلاً مورد استفاده قرار گرفته اند باید ابتدا در الكل 95 درصد قرار داده و با پارچه تمیز كاملاً خشك شوند).2- از یكی از دو لام به عنوان لام پخش كننده استفاده كنید. 3- حتی المقدور گسترش خون را باید از خون تازه ای كه به آن ماده ضد انعقاد افزوده نشده است تهیه كرد. چنانچه از خون دارای ماده ضد انعقاد استفاده می كنید باید در اسرع وقت نسبت به تهیه گسترش اقدام كنید. 4- به وسیله لوله میكروهماتوكریت یك قطره كوچك از خون مخلوط شده را در یك سانتی متری لبه لام قرار دهید. 5- لام را بر روی یك سطح صاف قرار دهید، در حالی كه قطره خون در طرف راست شما قرار دارد (برای افراد چپ دست بهتر است در سمت چپ قرار گیرد). 6- توسط انگشت نشانه و شست دست چپ دو طرف لام را نگه دارید و لام پخش كننده را طوری در دست راست بگیرید كه لام بین انگشت شست و چهار انگشت دیگر قرار گیرد (تصویر شماره 15).7- انتهای لام پخش كننده را كمی جلوتر از قطره خون قرار دهید، به طوری كه بین دو لام زاویه تقریباً 30 تا 45 درجه ایجاد شود. 8- لام پخش كننده را كمی به عقب بكشید تا با قطره خون تماس پیدا كند و خون در لبه لام به طور یكنواخت پخش گردد. چنانچه خون در سرتاسر لبه لام پخش نشد مقداری لام پخش كننده را حركت دهید تا این خون در سرتاسر لبه لام پخش شود. دقت كنید كه خون به قسمت جلوی لام پخش كننده سرایت نكند.9- لام پخش كننده را با یك حركت یكنواخت و ملایم در سطح لام دیگر حركت دهید تا یك لایه نازك از خون به دست آید.10- با تكان دادن گسترش در جریان هوا گسترش را به سرعت خشك كنید. گسترش را نباید به حرارت یا دمیدن به آن خشك كرد. 11- گسترش را می توان با نوشتن مشخصات بیمار نشانه گذاری كرد. نوشتن مشخصات توسط قلم الماس روی انتهای لام یا توسط مداد بر روی انتهای ضخیم گسترش خونی انجام می شود. 2- روش تهیه گسترش بر روی لامل 1- برای این روش، لامل های نمره 1 یا 5/1 (مربع به اضلاع 22 میلیمتر) توصیه می شود. لامل ها باید كاملاً تمیز باشند. 2- یكی از لامل ها را توسط دو گوشه آن بین انگشت شست و انگشت نشانه قرار دهید. 3- یك قطره كوچك خون به قطر 2 تا 3 میلیمتر در مركز لامل قرار دهید. 4- با دست دیگر یك لامل را مثل لامل اول نگه دارید.5- به آرامی لامل دوم را روی لامل اول كه حاوی یك قطره خون است به صورت ضربدری قرار دهید، به طوری كه قطره خون بین دو لامل دوم روی لامل اول قرار گیرد خون بین آن دو پخش می شود. 6- قبل از آنكه خون كاملاً بین دو لامل پخش شود، دو لامل را با یك حركت سریع، ناگهانی، افقی و در دو جهت مخالف بكشید. دقت كنید كه لامل دوم را نباید از روی لامل اول بلند كرد زیرا حفراتی در گسترش باقی خواهد ماند. همچنین باید از فشار دادن دو لامل بر روی یكدیگر خودداری شود. 7- هر دو لامل را به صورتی كه سطح گسترش رو به بالا قرار گیرد، روی كاغذ تمیزی قرار دهید تا در مجاورت هوا خشك شوند. بحث: 1- در گسترش روی لامل توزیع سلول ها اتفاقی تر از گسترش روی لام است ولی به علت كوچك و شكننده بودن لامل، فن و رنگ آمیزی گسترش بر روی لامل برای افراد مبتدی مشكل است.2- به محض اینكه قطره خون روی لامل اول قرار می گیرد باید بدون تأخیر لامل دوم روی آن قرار گیرد. اگر قطره خون بیشتر از 5-3 ثانیه بماند، توده شدن پلاكت ها و گلبول های سفید و قرمز و پدیده رولو در گلبول های قرمز ایجاد می شود. 3- قرار دادن قطره بزرگ خون باعث ضخیم شدن گسترش تهیه شده می گردد. 4- یك روش اصلاح شده تهیه گسترش بر روی لامل به این ترتیب است كه به جای یكی از لامل ها از یك لامل شیشه ای استفاده می شود. در این روش یك قطره خون در مركز لام شیشه ای قرار دهید و در حالی كه لامل بین دو انگشت شست و نشانه قرار دارد آن را روی قطره خون بر روی لام شیشه ای قرار دهید و قبل از اینكه پخش شدن خوب كامل شود، لامل را از لام به وسیله یك حركت سریع جدا كنید در نتیجه گسترشی كه بر روی لام ایجاد می گردد همانند گسترشی است كه بر روی لامل ایجاد می شود. 3- روش تهیه گسترش اتوماتیك یا چرخشی تهیه گسترش های خون به این روش، محاسن انجام ساده تهیه گسترش به روش روی لام و توزیع یكنواخت سلول ها به روش لامل را با هم دارد و به وسیله انواع خاصی از سانتریوفوژ به نام اسپینر (Spinner) انجام می شود. در این دستگاه یك لام شیشه ای تمیز روی یك صفحه پلاتین قرار گرفته و در حدود 2/0 میلی لیتر خون حاوی EDTA در مركز لام گذاشته می شود. سپس دستگاه روشن و موتور به كار می افتد و در یك زمان مشخص یك گسترش یك لایه ای بر روی كل سطح لام ایجاد می شود. دستگاه های پیشرفته تر اسپینر مجهز به سیستم نوری هستند. در این نوع دستگاه ها دسته ای از نور از لام به یك دستگاه حساس برخورد می كند و در زمانی كه سطح لام به میزان كافی از خون پر شد، دستگاه حساس آن را تشخیص داده و صفحه پلاتینی به طور خودكار از حركت باز می ایستد. در این روش خون بر اساس هماتوكریت بیمار بر روی لام پخش می شود. در این روش گسترش به گونه ای ایجاد می شود كه سلول ها از هم جدا بوده و هیچ كدام روی هم قرار نمی گیرند و گلبول های سفید را می توان به راحتی در هر نقطه از گسترش تشخیص داد. گسترش ها باید در هوا خشك شوند (عامری 1378) مرحله بعد تثبیت است كه به 3 روش انجام می شود:1) استفاده زا عبور گسترش ها 3-4 مرتبه روی شعله و توجه نمی شود.2) استفاده از الكل 5 دقیق 3) استفاده از محلول 50 درصد الكل فرمالین 1 دقیقه رنگ آمیزی به 3 روش روش عمودی 1- Romanowsky method جهت رنگ كردن چربی ها 2- Sudan Black Bجهت رنگ كربوهیدرات ها 3- Periodic Acid Schiff (PAS) روش 2 و3 اختصاص ماهی ها هستند. روش Romanowsky:1- تهیه و خشك كردن گسترش ها در هوا2- تثبیت در متانل 5 دقیقه 3- قرار دادن در رنگ Commercial leishman stain مدت 2 دقیقه 4- شستشوی كامل در آب 5- رنگ آمیزی با محلول Commercial Bfferd Gimsa 2 دقیقه 6- شستشو در بافی فسفات از مولار با PH 4/6 و سپس آب مقطر 7- خشك كردن در هوا در این روش سیتوپلاسم قرمز و هسته به رنگ آبی تیره و بنفش دیده می شود.2- روش سودان بلك B:1- تهیه و خشك كردن گسترش ها در هوا 2- تثبیت در فیكاتیو 10 میلی لیتر فرمالین و 90 میلی لیتر اتانل به مدت 5 ثانیه 3- شستشو در آب جاری به مدت 10 دقیقه 4- خشك كردن در هوا 5- رنگ آبزی با سودان بلك B به مدت 30-60 دقیقه دمای اتاق6- شستشو در اتانل 70 درصد 7-رنگ آمیزی به صورت lightly ملایم و سریع با Commercial Bufferd Gimsa مشابه روش رومانوسكی در نتیجه این روش چربی ها در سلول ها به رنگ سیاه و سایر ساختمان به رنگ خاكستری روشن می شود. 3- روش PAS:1- تهیه و خشك كردن گسترش ها در هوا 2- تثبیت در فیكاتیو فرمالین – اتانل به مدت 10 دقیقه 3- شستشو در آب جاری به مدت 10 دقیقه 4- رنگ آمیزی با Commercial Periodic به مدت 20 دقیقه 5- شستشو با آب شیر 6- غوطه ور كردن گسترش ها در Commercial Schiff reagent 20 دقیقه 7- شستشو و رنگ آمیزی با Commercial hemato yliue lightly 8- شستشو و خشك كردن در هوا در نتیجه این رنگ آمیزی در صورت مثبت بودن PAS رنگ قرمز تیره یا Rich magenta قرمز فلفلی یا بنفش ظاهر می شود كه البته درجه بروز رنگ متفاوت است.بحث در روش گسترش با 2 لامل 1- به محض قرار گیری قطره خون بر روی لام و بدون هیچ تأخیری باید گسترش تهیه شود هر گونه تأخیر باعث توزیع غیر طبیعی گلبول های سفید شود به طوری كه در انتهای نازك گسترش ها تجمع حاصل می كنند. و ممكن است گلبول های قرمز تولید حالت رولو كنند و پلاكت ها تجمع یابند.2- ضخامت بستگی به اندازه قطره خون، زاویه بین 2 لام و سرعت حركت لام پخش كننده بر روی لام دیگر دارد. در یك سرعت معین افزایش زاویه لام پخش كنند باعث افزایش ضخامت گسترش خواهد شد. 3- گسترش نباید تمام سطح را بپوشاند در گسترش خوب یك قسمت ضخیم یك قسمت نازك یك قسمت تغییر تدریجی از ضخیم به نازك وجود دارد. 4- گسترش ما باید ظاهری صاف و هموار داشته و هیچ گونه برآمدگی و موج فرو رفتگی نداشته باشند.5- در هنگام نشانه گذاری از خودكار نباید استفاده كرد. 6- به محض تهیه گسترش در جریان هوا خشك شود دیر خشك شدن سبب تجمع سلول ها و دندانه دار شدن اریتروسیت ها می شود. بحث در روش 2 لامل:1- در گسترش روی لامل توزیع سلول ها اتفاقی تر از گسترش روی لام است ولی به علت كوچك و شكننده بودن لامل، فن و رنگ آمیزی گسترش بر روی لامل برای افراد مبتدی مشكل است. 2- به محض قرار دادن قطره خونی روی لامل باید لامل دوم قرار گیرد زیرا بیشتر ماندن قطره خون سبب توده شدن پلاكت ها و گلبول های سفید و قرمز می شود. ادامه خواندن مقاله در مورد هماتوكريت يا حجم فشرده گلبولي

نوشته مقاله در مورد هماتوكريت يا حجم فشرده گلبولي اولین بار در دانلود رایگان پدیدار شد.